皮肤活检在皮肤病诊断中具有重要作用。活检部位、活检技术或保存媒介选择不当可造成误诊,比如活检部位选择不佳可能产生直接免疫荧光假阴性结果。
近期,太原肤康中医皮肤病医院院长主持会议就疱病、药疹、毛发疾病和肿瘤性疾病诊断中活检部位和活检技术选择的常见误区进行分析,现介绍如下:
疱病
自身免疫性疱病的准确诊断依赖临床病理学联系,以及显示循环自身抗体及其在皮肤粘膜中沉积模式的支持性检查。
直接免疫荧光(DIF)诊断类天疱疮的敏感性优于间接免疫荧光(IIF)或酶联免疫吸附试验(ELISA),首选躯干部非大疱性损害或损害边缘的皮肤(见图 1),大疱性损害和远离大疱的皮肤标本假阴性率升高,下肢皮肤假阴性率也升高。
图 1. 疑似大疱性类疱疮时用于 DIF 的活检标本应在非大疱性损害皮肤或水疱边缘 1 cm 内的未受累皮肤处取材
对在 48 小时内转至实验室接受直接免疫荧光检查的标本,生理盐水优于液氮、Michel 介质和 Zeus 介质。如果不慎将用于 DIF 的标本浸入福尔田林,应立即将其取出并浸入生理盐水,标本短时浸入福尔田林对大多数疱病无影响,但对天疱疮可造成假阴性结果。
对于大疱性类疱疮,拔取生长期毛发足以获得诊断性直接免疫荧光结果。在粘膜表面取材进行 DIF 时,由于直接临近糜烂面的组织松脆,可首选距损害 3~5 mm 的外观正常粘膜。
用于光镜检查的标本应尽可能显示完整的水疱或大疱,如果存在小水疱,首选切除整个损害。如果皮损较大,应在水疱边缘取材,包含部分水疱和完整皮肤。
结缔组织病
在慢性皮肤型红斑狼疮中,关键诊断学改变可存在于角质层至深部皮下脂肪的任何层次,显示这些特征的较佳标本直径应 ≥ 4 mm,可采用环钻取材,但狼疮性脂膜炎需深切,而皮肌炎常产生更表浅的萎缩性皮损,刮取活检足以显示诊断性结果。
与免疫性疱病不同,大多数结缔组织病损害周围皮肤的 DIF 无价值,因为免疫沉积仅存在于皮损处。肾病高危的活动性系统性红斑狼疮是一种例外情形,狼疮带可存在于正常的避光部位皮肤。该试验已被适用于相同人群的双链 DNA 抗体检测取代。
在慢性皮肤型红斑狼疮中,在成熟(>6 个月)但仍活动的损害处进行环钻活检时(见图 2),HE 染色切片和 DIF 的阳性率较高。
图 2. 疑似慢性皮肤型红斑狼疮应从成熟损害处取材进行直接免疫荧光检查
由于任何陈旧性水疱的顶部均可坏死而模仿多形红斑 / 中毒性表皮坏死松解的全层坏死,因此,首选在急性期损害处取材。如果需与固定性药疹相鉴别,活检标本还必须包括浅部和深部血管丛。
葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征因棘层松解在颗粒层水平产生了裂隙,在深度至表皮中部的活检标本即可观察到。多数情况下,坏死皮肤取样足以显示该特征。在疑似本病时还应行细菌培养,但皮肤裸露区域易继发细菌定植,落叶型天疱疮也可在 1~2 天内出现细菌定植,故慢性皮损组织培养对鉴别诊断无价值。
毛发疾病
所有类型的脱发均应避免在活动性进展边缘取材,因为成熟的损害诊断阳性率更高。可能需要超过 1 处活检标本才能确诊。为了增大头皮活检的诊断价值,环钻直径应 ≥ 4 mm,首选持续数月但仍活动的皮损(见图 3)。
图 3. 对于瘢痕性脱发患者,应从持续数月但仍活动的皮损处取材,充分发育的损害提供的诊断学价值高于进展性边缘
为避免横断毛囊,环钻的放置角度应与毛发方向一致。
目前已确定了不同人种的毛发密度,故对正常头皮进行取材用于比较的价值有限。
对于男性型脱发和休止期脱发,横切面的诊断学价值更高,可对生长初期、中期和休止期毛囊,以及终毛和毳毛的相对比例进行准确评估。对于其他大多数类型的脱发,包括瘢痕性脱发,连续垂直切片的诊断学价值更高。
同时采取纵切和横切面的价值较高。HoVert 技术先对标本进行横切,然后对上 1-mm 部分进行纵切,而 Tyler 技术先对标本进行纵切,然后对其中一半进行横切(见图 4)。
图 4. 同时获得纵切和横切面的两种技术